纯（chún）氟油Fluo-Oil 135(氟油3M Novec HFE7500电（diàn）子氟化液的替代品)

Fluo-Oil 135（简（jiǎn）称FO135） 是一（yī）种纯氟化油，可用于替换氟（fú）油3M Novec HFE7500电子氟化液。 Fluo-Oil 135氟油的化学和物理（lǐ）化学（xué）性质与3M Novec HFE7500 相似，如下表所示（shì）:

优势

生物相容性、可重复性和稳定（dìng）性。

如何使用？

氟油Fluo-Oil 135用于稀释FluoSurf Neat表面活性剂或已（yǐ）经用Fluo-Oil 135油稀释的表面活性剂（jì）。

（由（yóu）于FluoSurf Neat表面活性剂是一（yī）种PFPE-PEG结构（gòu）的复杂高（gāo）效纯表面活性剂，因为类似于PFPE-PEG结（jié）构的纯（chún）表面活性剂如（rú）FluoSurf Neat，Surf-Drop，PFPE-PEG-PFPE两（liǎng）嵌（qiàn）段或三嵌段表面活性剂，Surf 含氟表面活（huó）性剂等（děng），基本上都可以使用（yòng）纯氟油Fluo-Oil 135进（jìn）行稀释。稀释的浓度从0.2%到12%之间。）

保存（cún）

室温下（xià）避光（guāng）保存

安全注意事项

● 避免（miǎn）吸入、摄入和接（jiē）触皮肤和眼睛

● 穿戴耐化（huà）学（xué）腐（fǔ）蚀的个人防护装（zhuāng）备

● 戴上合适的手套

● 穿（chuān）合适的（de）防护服

● 戴侧护罩（zhào）的安全眼镜

与3M HFE7500油产生（shēng）液滴性能的测（cè）试比较

分别用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟化油稀释FluoSurf neat表面活性剂，得（dé）到4w/w%的质量浓度。

水滴产生或油包水液滴产生的两相流（liú）速：

油相流速为300μL/hr，水相（xiàng）流速为100μL/hr。

水相为PBS溶液或100μM荧光（guāng）素的PBS溶液（yè）（用（yòng）于测试液滴的（de）泄（xiè）露）

倒（dǎo）置显微镜观察和Image J软件分析（xī）。

一、液滴尺寸及其分布

在Fluo-Oil 135和HFE7500油（yóu）中，产生相（xiàng）似（sì）尺寸的水（shuǐ）滴。在既定流速参数（shù）下，液（yè）滴的（de）平均直径（jìng）为110μm。液滴（dī）尺寸的CV分别为2.3%（Fluo-Oil 135油（yóu））和2.9%（HFE7500油）。

二、液（yè）滴稳定性

大多（duō）数研究团队使用液滴微流体进行细胞封装或 PCR 应用。 因（yīn）此，需（xū）要通过 PCR 的（de）加热循环以及在（zài） 37°C 下长期（qī）孵育（yù）来产生稳（wěn）定的液滴。 表面活性剂的选择至关重要，但选择油（yóu）同样重（chóng）要（yào），以确保可重复的实验以（yǐ）及单分散液滴群的生成和保（bǎo）存。

分别从三个方面测试液（yè）滴的（de）稳定性：一是把液滴（dī）重新注（zhù）入到玻璃观察腔室内；二是经典的PCR热循环过程，循环过（guò）程30次，每次热循环为98°C运行10s, 50°C运行（háng）5s, 72°C运行10s；三是置于37℃的培养箱内放置3天（tiān）。对1万个液滴进行分析（xī）。

无论是在（zài） Novec™ HFE 7500 还是（shì） Fluo-Oil™ 135 中（zhōng）形成 FluoSurf™ 稳定的液（yè）滴，在 PCR 加热循环后或在 37°C 孵育 3 天后，液滴平（píng）均尺寸（cùn）在（zài）生成时保（bǎo）持不变 [约 110μm (0.7nL)] 。此外（wài），液滴种（zhǒng）群（qún）仍然是单分散的。 根据统计分析，计算出在加热循（xún）环后，只有 5% 的整体液滴的大小与平均初始液滴直（zhí）径（jìng）的差（chà）异超过 10%。

将（jiāng）氟（fú）化油从 Novec™ HFE 7500 切换到 Fluo-Oil™ 135 对液滴（dī）稳（wěn）定性没（méi）有（yǒu）影响。

三（sān）、液滴内的分子滞留

基于液滴（dī）的化学或生化分析依（yī）赖于试剂在单个液滴（dī）中保持隔离（lí）。 泄漏到连续（xù）相和（hé）液滴之间的交换，即使很（hěn）低，也会影（yǐng）响（xiǎng）结（jié）果（guǒ）的完整（zhěng）性，因此，分子保留（liú）是选择氟（fú）化油时要考虑的（de）重要（yào）参数。 众所（suǒ）周知，氟（fú）化（huà）油会限制液滴之间的（de）分子（zǐ）交换（huàn），因此应验证切换（huàn）油的（de）影（yǐng）响。

同时生成两种油（yóu）包水（shuǐ）乳液[“空”（负载 PBS）和“满（mǎn）”（负（fù）载（zǎi）荧（yíng）光素）液滴]，一次（cì）使（shǐ）用 Novec™ HFE7500，然后（hòu）使（shǐ）用 Fluo-Oil™ 135 作为（wéi）连续相。 两种混合物，每（měi）一种都包（bāo）含（hán）两个种群，在 37°C 下孵（fū）育，并（bìng）在不同的时间点拍摄照（zhào）片。 使用 ImageJ 软（ruǎn）件对液滴内荧光强度的（de）演变进行了统计定（dìng）量分析。

上图显示了两个群体之间平均（jun1）荧光强度差异的演变（染料加载（zǎi）和空液滴）以及在（zài）初（chū）始时间点和 48 小时后相关的（de）荧光和明场（chǎng）图片。

在 24 小时的过（guò）程中，两种氟化油（yóu）产生的液滴中荧光素的泄漏率（lǜ）相似（约 15% 泄（xiè）漏），并且在 Fluo-Oil™ 135 中产生液滴的情况（kuàng）下（xià）保持恒定（dìng） 3 天。相反，在 24 小时后， Novec™ HFE7500 中（zhōng）液滴的泄漏继（jì）续减少并达到（dào） 30% 左（zuǒ）右。 这种较长孵育时间的较（jiào）差保留性能可归因于后一种油的（de）粘度略（luè）低，加速了液滴之间更快的分子交换。

结（jié）论

对于基（jī）于液（yè）滴的微流（liú）体应（yīng）用，从一种氟化油类型切换到另一种类型可（kě）能会对微流体实验的过程产（chǎn）生重大影响，尤其（qí）是对液滴（dī）的有效（xiào）生成产生重大影响。 在（zài）氟油3M Novec™ HFE7500电（diàn）子氟化液 和 氟油Fluo-Oil™ 135 的情况下，已（yǐ）证实更换这两种氟化油对实（shí）验条件和结果没有影响（xiǎng）。 当使用 Fluo-Oil™ 135 作为（wéi）连续相时（shí），甚至可（kě）以观（guān）察到荧光素在液（yè）滴内的更好（hǎo）保留。

氟化油Fluo-Oil™ 135 是用于液滴微流体应用的3M Novec™ HFE7500 氟（fú）油 的有效替代品。